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染色技术

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MASSON染色

发表日期:2016年03月11日 点击击数: 1349

Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。孔隙的大小,决定了组织的渗透性。如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
可以染色的组织:1.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤、平滑肌瘤、横纹肌瘤、神经纤维瘤甚至它们的肉瘤等都产生一定的纤维,2.在慢性炎症,机化和瘢痕形成中,可随病理过程的发展而出现胶原纤维。如慢性肾小球肾炎的肾小球纤维化后,V.G.染色呈红色。大叶性肺炎或血栓发生机化后,原有的纤维蛋白灶内出现胶原纤维,V.G.染色呈红色。风湿性肉芽肿已静止时,阿啸夫氏(Aschoff\'s)。巨细胞消失,病灶内的纤维被胶原纤维取代,V.G.染色也呈红色。胃、十二指肠溃疡愈复时,在渍疡底部出现胶原纤维构成的疤痕,慢性阑尾炎时阑尾壁出现的纤维化,肝硬化时胶原纤维的增生,这些用V.G。染色也都染成红色。3.血管壁的胶原纤维染色对病理诊断也很重要。良性高血压,小动脉的玻璃样变,V.G.染色阳性。恶性高血压病时,小动脉管壁为纤维素样坏死,V.G.染色阴性而纤维素染色阳性,4.V.G.染色对是高血压性血管疾患还是淀粉性样变血管损害的鉴别也很重要。H-E染色的玻璃样变和淀粉样变有时很难区别,用V.G.染色和淀粉样物质染色则可作出区别。如高血压性肾固缩其小动脉壁V染色呈红色。而淀粉样物质沉积的小动脉壁V.G.染色呈黄色。

试剂配置
Masson复合染色液 酸性复红1g,丽春红2g,橘黄G2g, 0.25%醋酸300ml。
亮绿染色液 高绿SF0.1g, 0.2%醋酸100ml。
染色步骤:
1.组织固定,切片,脱蜡至水,
2.Masson复合染色液5分钟 ,
3.0.2%醋酸水溶液稍洗 ,
4.5%磷钨酸5~10分钟 ,
5.0.2%醋酸水溶液浸洗2次,
6.亮绿染色液5分钟,0.2%醋酸水溶液洗2次,
7.无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片.

结果为胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色。

注意事项
Masson复合染色液经过磷钨酸分化时要用显微镜控制到肌纤维清晰为止。

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