发表日期:2016年03月11日 点击击数: 1384
操作步骤
1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精 Carnoy固定液: 纯酒精 60 ml 冰醋酸 10ml 氯仿 30ml 2. 染色液
1) 过碘酸酒清夜配法:
过碘酸(HIO .2H O) 0.4g
95% 酒精 35ml
M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml
蒸馏水10ml
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.
2) Schiff氏液:
0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤,加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.
3) Schiff氏酒精液配置
Schiff氏液 11.5ml
1N HCI 0.5ml
纯酒精 23ml
4) 亚硫酸水
10%偏重亚硫酸钠 10ml
1N HCI 10ml
蒸馏水 180ml的树胶溶解。
PAS组织染色流程:
1.烤片60℃~65℃,1~2h,从烤箱中取出切片,无需冷却,立即放入二甲苯溶液中脱蜡30min,梯度酒精脱二甲苯,流水冲洗5min
2.滴加0.5%高碘酸,湿盒内反应10min,流水冲洗2min
3.滴加Schiff液,湿盒内避光反应15min
4.苏木素30sec,流水冲洗5min,盐酸酒精3sec,流水冲洗5min,碳酸锂或氨水3sec,流水冲洗5min
5.梯度酒精脱水,二甲苯透明30min,中性树胶封片