组织学(histology)是研究机体微细结构及其相关功能的科学。只有认识人体的微细结构及其相关功能,才能全面掌握人体的形态结构,探索生命现象的物质基础。
形态学(morphology)研究内容包括正常人体的细微结构及其功能关系;个体的发生发展及其变化的规律;疾病的病理、发病机理及发生发展的规律。形态学实验主要是通过对大体标本、组织学切片,模型及电镜照片和录像的观察等实验课的学习,对理论知识的理解和巩固起着重要的作用。
常规石蜡包埋组织切片的制备
㈠组织块依序进行:①水洗,②脱水,③透明,④浸蜡,⑤包埋和⑥切片。 ㈡组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为易燃、有毒物,必须专人管理,2m以内不得有明火,局部环境应有良好的通风和消防设施。 ㈢常规切片的手工操作(步骤次序和各步骤的持续时间) 1.水洗:用流水冲洗已经固定的组织块30min。 2.脱水(常温下) (1)乙醇-甲醛(AF)液固定 60~120min
(2)80%乙醇 60~120min
(3)95%乙醇Ⅰ 60~120min
(4)95%乙醇Ⅱ 60~120min
(5)无水乙醇Ⅰ 60~120min
(6)无水乙醇Ⅱ 60~120min
(7)无水乙醇Ⅲ 60min
[注意事项]①未经充分固定的组织不得进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为组织块总体积的5~10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换(500ml乙醇可用于500个组织块脱水;加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时,提示需要更换)。⑤较大组织块的脱水时间长于较小者,应将两者分开进行脱水。⑥组织置于无水乙醇内的时间不宜过长(以免硬化)。⑦丙酮脱水性能强,会使组织块过缩、硬脆,不宜用以替代无水乙醇。
3.透明
(1)二甲苯Ⅰ 20min
(2)二甲苯Ⅱ 20min